دانشگاه گیلانفیزیولوژی و بیوتکنولوژی آبزیان2345-39662320151023Effects of sublethal contractions of Fenpropathrine pestiside on serum Na+, K+ and cortisol of common carp (Cyprinus carpio)تاثیر غلظتهای تحت کشنده حشرهکش فنپروپاترین بر سدیم، پتاسیم و کورتیزول سرم ماهی کپور معمولی (Cyprinus carpio)1121334FAمحسنجعفرینژادمجیدعسکری حصنی0000-0001-9309-2212اکبرکریمینرگسامرالهی بیوکیمینامعتمدیJournal Article20151027The study of the influence of serum indices can be a good indicator to assess the toxicity of pesticides in the environment. In this study, the effects of Fenpropathrine on plasma Na<sup>+</sup>, K<sup>+</sup> and cortisol level of common carp, <em>Cyprinus carpio</em> was investigated. The acute toxicity concentration (LC<sub>50</sub>) was determined for 96 hours according to O.E.C.D (1989) standard method. Then fish specimens were exposed to 5, 10 and 20% of LC<sub>50</sub> (14µg/l) and also control group with three replicates. In each treatment, 54 healthy fish specimens (mean standard length: 7.8±0.6cm; mean weight: 10±1.2 g) were used. Sub lethal experiment was conducted for a period of 14 days and blood sampling was collected at 1, 7 and 14th day post exposure time. Plasma Na<sup>+</sup>, K<sup>+</sup> and cortisol levels were measured. The results show that plasma K<sup>+</sup> levels of the exposed specimens increased and levels of plasma Na<sup>+ </sup>decreased significantly. Plasma cortisol levels increased in all treatments compared to control during the first day, and then decreased gradually. In conclusion, Fenpropathrine have direct effect on common carp stress and osmoregulation mechanisms.مطالعه میزان تاثیرپذیری شاخصهای سرمی میتواند معیار خوبی برای ارزیابی تاثیر سمیت حشرهکش در محیط باشد. در این مطالعه اثرات سم فنپروپاترین بر میزان سدیم، پتاسیم و کورتیزول خون ماهی کپور معمولی بررسی شد. در ابتدا غلظت سمیت حاد کشنده (LC<sub>50</sub>) به مدت 96 ساعت و بر اساس روش استاندارد O.E.C.D (1989) تعیین شد. پس از تعیین سمیت حاد، نمونه ماهیان در سه تیمار با غلظتهای 5، 10 و 20 درصد حد کشندگی (14 میکروگرم در لیتر سم فنپروپاترین) و یک تیمار شاهد با سه تکرار قرار گرفتند. در هر تیمار 54 قطعه ماهی سالم با میانگین وزنی2/1±10 گرم و میانگین طول استاندارد 6/0±8/7 سانتیمتر قرار داده شد. آزمایش تحت کشندگی به مدت 14 روز انجام گرفت و در زمانهای 1، 7 و 14 روز پس از شروع آزمایش خونگیری صورت پذیرفت و میزان سدیم، پتاسیم و کورتیزول پلاسمای خون ماهیان در هر تیمار سنجیده شد. با توجه به نتایج به دست آمده، با افزایش غلظت فنپروپاترین میزان سدیم پلاسما کاهش و پتاسیم افزایش معنیداری داشت. میزان کورتیزول پلاسمای خون در تمام تیمارها، در روز اول افزایش قابل ملاحظهای نسبت به گروه شاهد نشان داد (05/0P<) و پس از آن به تدریج کاهش یافت. بنابراین میتوان نتیجه گرفت که سم فنپروپاترین تاثیر مستقیمی بر مکانیسم استرس و تنظیم اسمزی ماهی کپور معمولی دارد.https://japb.guilan.ac.ir/article_1334_230807451216ec4eba3d6f882d0a89d6.pdfدانشگاه گیلانفیزیولوژی و بیوتکنولوژی آبزیان2345-39662320151023Optimization of single-cell gel electrophoresis (SCGE) method for study of liver single cell DNA in Caspian kutum (Rutilus frisii kutum)بهینهسازی آزمون کامت قلیایی برای مطالعه DNA سلول های منفرد کبدی در ماهی سفید دریای خزر (Rutilus frisii kutum)13301335FAمیلاداسماعیل بیگیمحمد رضاکلباسیJournal Article20151027Single-cell gel electrophoresis (SCGE) is a method that used to evaluate DNA damage in single cells. This method due to its great precision and high operating speed, considered than to other methods. The present study was performed to optimize some of the alkaline comet assay steps by using Caspian kutum )<em>Rutilus frisii kutum</em>( liver single cells. Hence, one batch of the fish fingerlings was used for the experiment (n=10, 7±1g) and fish liver tissues were dissected and transferred to freezer (-80C°) until starting the optimizing procedure and other common methods for comet assay tests. In optimization of conventional method for obtain single cells, centrifuging steps were deleted. Also, the solidification of gel on slides decreased and lysing time of cell membrane increased. Finally, a simple way to archive slides stained with ethidium bromide was present for at least two weeks. In addition to reducing experimental time and consumption materials, the optimized method led to lower cell damage and possibility of artificial error. No significant differences were observed between comet indexes, such as comet length (px), comet height (px), tail length (px), DNA% in tail and tail moment, achieved from the optimized and conventional method.الکتروفورز سلولهای منفرد روشی است که برای سنجش آسیب DNA استفاده میشود. این روش به علت سهولت و سرعت بالا نسبت به روشهای دیگر مورد توجه قرار گرفته است. در مطالعه حاضر با اعمال برخی از تغییرات، روش مرسوم سنجش کامت قلیایی با استفاده از سلولهای منفرد کبد ماهی سفید دریای خزر(<em>Rutilus frisii kutum</em>) بهینهسازی شد. برای این منظور 10 عدد ماهی انگشت قد با وزن متوسط 1±7 گرم و میانگین طول کل 2±10 سانتیمتر تهیه شد و از بافت کبد آنها نمونهبرداری شد. نمونهها تا شروع آزمایشها در فریزر 80- قرار داده شدند. در بهینهسازی روش مذکور برای دستیابی به سلولهای انفرادی مراحل مختلف سانتریفیوژ حذف شد، مدت زمان انجماد ژل روی اسلایدها کاهش و مدت زمان حذف دیواره سلولی با بافر لیز کننده افزایش پیدا کرد و در نهایت روشی ساده برای آرشیو لامهای رنگآمیزی شده با اتیدیوم بروماید به مدت حداقل دو هفته ارائه شد. نتایج نشان داد علاوه بر کاهش مدت زمان و مواد و وسایل مصرفی، احتمال خطا نیز کاهش یافت. همچنین شاخصهای آزمون کامت مانند طول کامت، ارتفاع کامت، طول دنباله، درصد DNA در دنباله و Tail Moment در مقایسه با روش بهینهسازی شده اختلاف معنیداری را نشان نداد (05/0P>).https://japb.guilan.ac.ir/article_1335_a09be05a1c3f85812694e87be0223ca7.pdfدانشگاه گیلانفیزیولوژی و بیوتکنولوژی آبزیان2345-39662320151023Antifungal effects of organic and aqueous extracts of the Persian Gulf sea urchin (Echinometra mathaei) against three strains of pathogenic fungiاثرات عصارههای آلی و آبی استخراج شده از توتیای دریایی خلیج فارس (Echinometra mathaei) بر سه سویه بیماریزای قارچ Candida31451336FAسیماراهیبهروزحیدریمهدیرساJournal Article20151027In the present study, antifungal effects of different components extracts in the Persian Gulf sea urchin <em>Echinometra mathaei</em> were investigated. It was used from fungi including <em>Candida</em> <em>albicans</em>, <em>Candida</em> <em>glabrata and</em> <em>Candida</em> <em>parapsilosis </em>due to the pathogenicity and prevalence of them. The samples of sea urchin were collected from the coasts of the Persian Gulf, dissected, and extracted by phosphate buffered saline, ethanol and acetonitrile solvents. The antifungal activities of the extracts have been evaluated using the well diffusion method in two concentrations of 1500 and 600 µg/well. The antifungal activity of extracts was observed in the gonad and test as well as spin (against one of fungi strains). The extracts of oral segments did not show any antifungal effects. Considering to the results, the gonad and test of the sea urchin are suggested for purification of effective compounds be prioritized for future studies.مطالعه حاضر در رابطه با اثرات ضدقارچی اجزای مختلف توتیای دریایی <em>Echinometra mathaei</em> صورت گرفته است. گنادها، پوسته، خارها و بخشدهانی توتیای دریایی مورد مطالعه قرار گرفتند. از سویههای قارچی <em>Candida albicans</em>، <em>Candida glabrata</em> و <em>Candida parapsilosis</em> به دلیل بیماریزا بودن و شیوع فراوان آنها استفاده شد. توتیایدریایی از سواحل خلیج فارس جمعآوری شد و پس از کالبدشکافی، از بخش دهانی، گناد، پوسته و خار توتیای دریایی توسط سه حلال سدیم بافر فسفات، اتانول و استونیتریل عصارهگیری به عمل آمد. فعالیت ضدقارچی عصارهها، با استفاده از روش Well Diffusion، در دو غلظت 600 و µg/well 1500، مورد ارزیابی قرار گرفت. فعالیت ضدقارچی پوسته و گناد و همچنین خار (علیه یکی از سویههای قارچی) مشاهده شد. عصاره بخش دهانی در همه آزمایشها فاقد فعالیت ضدقارچی بود. بنابر نتایج، پیشنهاد میشود که بخش پوسته و گناد توتیایدریایی جهت استخراج ترکیبات موثر در مطالعات آینده، در اولویت قرار گیرد.https://japb.guilan.ac.ir/article_1336_22f192778808759f0e46cde6a056a795.pdfدانشگاه گیلانفیزیولوژی و بیوتکنولوژی آبزیان2345-39662320151023Comparative study of the basic levels of antioxidant enzyme activity superoxide dismutase and catalase enzymes of fish grouper (Epinephelus coioides) in in vitro and in vivo modelsبررسی مقایسهای سطح پایه آنزیمهای آنتیاکسیدانی سوپراکسید دیسموتاز و کاتالاز ماهی هامور معمولی (Epinephelus coioides) در مدل طبیعی (استفاده از جاندار) و مدل آزمایشگاهی (کشت سلول)47671337FAنگیندرخششعبدالعلیموحدی نیا0000-0001-9238-8812نگینسلاماتمحمودهاشمیتباروحیدبیاتیJournal Article20151027In present study, two natural antioxidant enzyme, catalase and superoxide dismutase, activities were compared in different conditions, <em>in vivo</em> and <em>in vitro</em> models, and weights (100, 500 and 900 g) in grouper <em>Epinephelus coioides</em>. After wiping the fishes with, the liver was removed and digested by collagenase type 4. Then, the separated cells were cultured in Lebowitz (L-15) medium and incubated at 30°C for two weeks. In the next stage of the study, three grouper in each group were used. According to the results, a statistically significant difference was observed between two models (P˂0.05). A significant correlation was also observed in the activity of antioxidant enzymes among weight groups (P˂0.05). Taken together, according to the results, despite the significant differences between them it was concluded that the <em>in vivo</em> and <em>in vitro</em> models are so similar; therefore, cell culture can be utilized in biological studies of antioxidant enzymes in liver as an alternative method to <em>in vivo</em> model.در این مطالعه، میزان فعالیت آنتیاکسیدانهای آنزیمهای کاتالاز و سوپراکسید دیسموتاز در دو مدل آزمایشگاهی (استفاده از کشت سلول) و مدل طبیعی (استفاده از جاندار) و در گروههای وزنی 100، 500 و 900 گرمی با یکدیگر مقایسه شدند. در بخش نخست این مطالعه به منظور انجام روش کشت سلولی از 5 قطعه ماهی هامور معمولی استفاده شد. ابتدا بدن ماهی ضدعفونی شده و پس از جدا کردن بافت کبد، بافتها توسط آنزیم کلاژناز تیپ 4 هضم و به مدت 2 هفته در دمای C°30 در انکوباتور و محیط کشت Lebowitz (L-15) کشت داده شدند. در بخش دوم این پژوهش از تعداد 3 قطعه ماهی هامور معمولی استفاده شد. مطابق با نتایج حاصل از این مطالعه، اختلاف آماری معنیداری در بین دو مدل تحت مطالعه، مشاهده شد (05/0P˂). بررسی میزان همبستگی بین میزان فعالیت آنزیمهای آنتیاکسیدانی در گروههای وزنی نیز بیانگر وجود همبستگی معنیدار در بین گروهها بود (05/0P˂). در مجموع با توجه به نتایج حاصل از این مطالعه، میتوان به این نتیجه دست یافت که در مطالعات زیستشناختی، به جای استفاده از موجود زنده از روش کشت سلولی استفاده کرد.https://japb.guilan.ac.ir/article_1337_cd8e76ccd5e668c6787b65cbcdaf49c2.pdfدانشگاه گیلانفیزیولوژی و بیوتکنولوژی آبزیان2345-39662320151023Establishment and characterization of epithelial-like cell line from Caspian trout (Salmo trutta caspius) fin tissuesتولید و ارزیابی رده سلولی اپیتلیالی شکل از بافت باله ماهی آزاد دریای خزر (Salmo trutta caspius)69881338FAکاوهنوروزیمحمدرضاکلباسیپروانهفرزانهسیدابوالحسنشاهزاده فاضلیمریمفرقداناحمدنسیمیانمهرنازایزدپناهسپیدهآشوری موثقشیوامحمدیزهرامرادمندمنصورهفرهنگنیاJournal Article20151027Cell lines provide an important biological tool for carrying out investigations into physiology studies and their applications are more growing every day. Here we tried to establish a cell line from Caspian salmon (<em>Salmo trutta caspius</em>). We used Caspian salmon fry and two primary culture methods, Explant and Enzymatic disaggregation were undertaken. Cell migration from pectoral, dorsal, caudal and anal fins was studied. Leibovitz’s L-15 with 20% FBS and 1% Pen-Strep was used as culture medium. Karyotyping was conducted to characterization of established cell line. Consequently cells were freezed with DMSO and stored at -196˚C. Explant Efficiency was showed that the best fin for explant is pectoral fin with the average of 71.31%. In comparison between two primary culture methods, enzymatic disaggregation with trypsin was more efficient. Chromosome counts were suggested 2n=80 and viability was 84.4% after one month storage in liquid nitrogen. Consequently, these cells have been subcultured, Freezed and defreezed over 22 times since their initiation and showed reasonable growth rate, therefor they can be used as cell lines in other studies. These cell lines can be reached at Iranian Biological Resource Center (IBRC) as the first aquactic animal cell strain with short names; CS2-1,CS2-2, CSe and IBRC C10190-3 catalogue numbers.امروزه کشت سلول ابزار بسیار مفیدی برای پاسخ به بسیاری از سؤالات در زمینهی زیستشناسی محسوب میشود و کاربرد ردههای سلولی روز به روز در حال افزایش است. در این مطالعه تولید کشت اولیه و Cell line ماهی آزاد دریای خزر (<em>Salmo trutta caspius</em>) مورد بررسی قرار گرفت و دو روش کشت اولیه Explant و روش جداسازی آنزیمی به کمک آنزیم تریپسین به منظور تولید کشت اولیه استفاده شد. مهاجرت سلول از بالههای سینهای، پشتی، دمی و مخرجی در روش Explant با یکدیگر مقایسه شد. تاثیر مدت زمانهای مختلف تماس با تریپسین بر روی سلولها با یکدیگر مقایسه شد. محیط کشت Leibovitz’s L-15 به همراه %20 FBS و %1 Pen-Strep استفاده شد. به منظور ارزیابی رده تولید شده، از سلولها کاریوتیپ تهیه شد و در نهایت این سلولها با کمک DMSO فریز شدند و به دمای C˚196- منتقل شدند. محاسبات کارایی کشت بافت نشان داد که باله سینهای با میانگین %31/71 بهترین باله به منظور تولید رده سلولی از این ماهی است. در مقایسه کلی بین روشهای کشت اولیه، در روش جداسازی آنزیمی با آنزیم تریپسین نسبت به روش Explant، سلولهای زنده بیشتری حاصل شد. عدد کروموزومی سلولها 80=n2 بود و درصد زندهمانی بعد از گذشت یک ماه در ازت مایع %4/84 بود. با توجه به اینکه این سلولها تا 22 نوبت پاساژ و انجماد و ذوب متوالی، از قابلیت رشد خوبی برخوردار بودهاند، از آنها میتوان در مطالعات مختلف استفاده کرد. این سلولها به عنوان اولین رده سلولی Cell Strain) ) از آبزیان تولید شده در کشور در بانک سلولهای جانوری مرکز ذخائر ژنتیکی و زیستی ایران (IBRC) با کدهای CS2-1، CS2-2 و CSe و شماره دستیابی 3-IBRC C10190 نگهداری میشود.https://japb.guilan.ac.ir/article_1338_98790f540e68fa08551a4c9e358f33f6.pdfدانشگاه گیلانفیزیولوژی و بیوتکنولوژی آبزیان2345-39662320151023Using degree of tissue changes (DTC) of gill in Euryglossa orientalis as a bioindicatore of pollution in Mussa Creekاستفاده از درجه تغییرات بافتی آبشش ماهی کفشک راستگرد (Euryglossa orientalis) به عنوان بیواندیکاتور آلودگی خور موسی891051339FAخدیجهخلیفینگینسلاماتعبدالعلیموحدینیا0000-0001-9238-8812امیر پرویزسلاطیJournal Article20151027One of the most important ecosystems of Persian Gulf which is severely affected by pollution is Mussa creek. The goal of this study was using gill pathological alterations to investigate effects of contaminants on <em>Euryglossa orientalis</em> in Musa creek. A number of 100 <em>Euryglossa orientalis</em> were collected from five sampling sites in Mussa creek including: Petrochemical, Gaafari, Magidieh, Ghazaleh and Zangi and gill samples were studied based on the routine histological methods. The most pathological changes observed in the fish gill were hypertrophy and hyperplasia of the lamellar epithelial cells, tlangictasia and congestion in blood vessels, oedema, lamellar fusion, lamellar disorganization and epithelial lifting. Degree of tissue changes of gill in <em>E. orientalis</em> in stations followed the pattern of Petrochemical≥ Magidieh> Ghazaleh> Gaafari> Zangi. The results showed that the gill pathological alternations in <em>E. orientalis</em> have direct relation with the amount of pollution in different stations of Mussa creek.از مهمترین اکوسیستمهای خلیج فارس که به شدت متاثر از آلودگی بوده، خور موسی است. هدف این مطالعه استفاده از تغییرات پاتولوژیکی آبشش جهت بررسی اثرات آلایندههای خور موسی بر گونه کفشک راستگرد است. در این مطالعه 100 قطعه ماهی کفشک راستگرد (<em>Euryglossa orientalis</em>) از پنج ایستگاه در خور موسی شامل: پتروشیمی، جعفری، مجیدیه، غزاله و زنگی جمع آوری شد و نمونههای آبشش بر اساس روشهای مرسوم بافتشناسی مورد مطالعه قرار گرفت. تغییرات مشاهده شده در آبشش شامل هیپرتروفی و هیپرپلازی سلولهای اپیتلیالی، تلانژیکتازی و تجمع خون در مویرگهای تیغهای، ادم تیغهای، اتصال تیغهها، بینظمی تیغهها و برآمدگی اپیتلیوم تیغهای بود. درجه تغییرات بافتی آبشش ماهی کفشک راستگرد در ایستگاهها تابع الگوی پتروشیمی≥ مجیدیه> غزاله> جعفری> زنگی بود. نتایج نشان داد تغییرات ساختار بافت آبشش ماهی کفشک راستگرد رابطه مستقیمی با میزان آلودگی ایستگاههای مختلف خور موسی دارد.https://japb.guilan.ac.ir/article_1339_6ea13d35c7f74acfde39323fcb9590fe.pdf