بررسی اثر تغییرات دما و غلظت سرم جنین گاوی بر روند رشد و تکثیر سلول‌های تخمدانی کشت داده شده ماهی مید (Liza klunzingeri)

نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان

1 دانشجوی دکتری زیست‌شناسی دریا، گروه زیست‌شناسی دریا، دانشکده علوم دریایی، دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر، خرمشهر، ایران

2 مربی گروه زیست‌شناسی، دانشکده علوم پایه، دانشگاه پیام نور، تهران، ایران

3 دانشیار گروه زیست‌شناسی دریا، دانشکده علوم دریایی و اقیانوسی، دانشگاه مازندران، بابلسر، ایران

4 دانشیار گروه زیست‌شناسی دریا، دانشکده علوم دریایی، دانشگاه علوم و فنون دریایی خرمشهر، خرمشهر، ایران

5 دانشیار مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور، اهواز، ایران

6 استادیار مرکز تحقیقات سلولی و مولکولی، دانشگاه علوم پزشکی جندی شاپور، اهواز، ایران

چکیده

   هدف از انجام این مطالعه، بررسی تاثیر میزان درصد سرم جنین گاوی (FBS) و تغییرات دمایی در کشت اولیه سلول‌های تخمدانی ماهی مید (Liza klunzingeri) بود. به همین منظور تعداد10 قطعه ماهی با میانگین وزنی 45 تا 50 گرم صید و به صورت زنده به آزمایشگاه منتقل شد. بعد از ضدعفونی کردن بدن ماهی‌ها توسط الکل اتانول %70، بافت تخمدان از بدن خارج و توسط قیچی به قطعات ریز تقسیم شد. سلول‌های تخمدانی با استفاده از آنزیم تریپسین جداسازی و در فلاسک‌های حاوی محیط کشت L-15 در شرایط متفاوت دمایی (20، 25، 28، 30 و 32 درجه سانتی‌گراد) و میزان سرم جنین گاوی (0، 10، 15 و 20 درصد) کشت شدند. شمارش سلول‌ها نشان داد که رشد سلول‌های تخمدانی ماهی مید در محیط کشت دارای FBS 15 درصد به حداکثر خود رسید، در حالی که تغییرات دمایی تاثیر چندانی بر رشد سلول‌های این ماهی نداشت. در مجموع، مناسب‌ترین شرایط برای کشت سلول‌های تخمدانی ماهی مید، استفاده از FBS 15 درصد و دمای بالاتر از 20 درجه سانتی‌گراد است.

کلیدواژه‌ها


نوروزی ک.، کلباسی م.، فرزانه پ.، شاهزاده فاضلی س.، فرقدان م.، نسیمیان ا.، ایزدپناه م.، آشوری موثق س.، محمدی ش.، مرادمند ز. و فرهنگ‌نیا م. 1393. تولید و ارزیابی رده سلولی اپتیلیایی‌شکل بافت باله ماهی آزاد دریای خرز (Salmo trutta caspius). فیزیولوژی و بیوتکنولوژی آبزیان، 2(3): 88-69.
Almeida P.R. 2003. Feeding ecology of Liza ramada (Risso, 1810) (Pisces, Mugilidae) in a south-western estuary of Portugal. Estuarine, Coastal and Shelf Science, 57: 313–323.
Ameida P.R. 2003. Feeding ecology of Liza ramada (Risso, 1810) (Pisces, Mugilidae) in a south- western estuary of Portugal. Estuarine, Coastal and Shelf Science, 57: 313–323.
An L., Hu J., Yang M., Zheng B., Wei A., Shang J. and Zhaho X. 2011. CYP1A mRNA expression in redeye mullets (Liza haematocheila) from Bohai Bay. Marine Pollution Bulletin, 62(4): 718–725.
Bain P.A., Hutchinson R.G., Marks A.B., Crans M.J. and Schuller K.A. 2013. Establishment of a continuous cell line from south bluefine tuna (Thunnus maccoyii). Aquaculture, 59(3): 59–63.
Boglion C., Costa C., Giganti M., Cecchetti M., Di Dato P., Scardi M. and Cataudell S. 2006. Biological monitoring of wild thicklip grey mullet (Chelon labrosus), golden grey mullet (Liza aurata), thinlip mullet (Liza ramada) and flathead mullet (Mugil cephalus) (Pisces: Mugilidae) from different Adriatic sites: meristic counts and skeletal anomalies. Ecological Indicators, 6(4): 712–732.
Cardona L. 2001. Non-competitive coexistence between Mediterranean grey mullet: Evidence from seasonal changes in food availability, niche breadth and trophic overlap. Journal of Fish Biology, 59: 729–744.
Fent K. 2001. Cytotoxicity of organic environmental chemicals to fish liver cells (PLHC-1). Marine Environmental Research, 42: 377–382.
Fryer J.L. and Lannan C.N. 1994. Three decades of fish cell culture: A current listing of cell lines derived from fish. Journal of Tissue Culture Methods, 16: 87–94.
Khamis O. and Hashem M.H. 2012. Developing a cell culture system from Nile tilapia (Oreochromis niloticus, L.) ovarian tissue in Egypt. IOSR Journal of Agriculture and Veterinary Science, 2: 8–12.
Kumar A., Sharma B. and Pandey R.S. 1998. Assessment of stress in effect to pyrethroid insecticides, λ-cyhalothrin and cypermethrin, in a freshwater fish, Poecilia reticulata (Bloach). Cellular and Molecular Biology Letters, 58: 153–159.
Lakra W.S., Swaminathan T.R. and Joy K.P. 2011. Development, characterization, conservation and storage of fish cell linesi, a review. Fish Physiology and Biochemistry, 37: 1–20.
Laffaille P., Feunteun P., Lefebvre C., Radreau A., Sagan G. and Lefeuvre J.C. 2002. Cthin- lipped mullet directly exploit the primary and detritic production of European macrotidal salt marshes? Estuarine, Coastal and Shelf Science, 54(4): 729–739.
McMaster M.E., Munkittrick K.R., Jardine J.J., Robinson R.D. and Van Der Kraak G.J. 1995. Protocol for measuring in vitro steroid production by fish gonadal tissue. Canadian Technical Report of Fisheries and Aquatic Sciences 1961. 78P.
Pastor D., Boix J., fernandes V. and Albaiges J. 1996. Bioaccumulation of organachlorinated contaminants in three estuarine fish speciel (Mullus barbatus, Mugil cephalus and Dicentrarchus labrax). Marine pollution Bulletin, 32(3): 257–262.
Part P., Morrghan L., Bergsrom E. and sjoberg P. 1993. Primary cultures of epithelial cells from rainbow trout gills. Indian Journal of Experimental Biology, 175: 219–233.
Roy S. and Bhattacharya S. 2016. Arsenic-induced histopathology and synthesis proteins in ovary and kidney of Channa punctatus. Ecotoxicology and Environment Safety, 65(2): 218–229.
Salamat N., Erfani Majd N., Hashemitabar M., Mesbah M. and Ahangarpoor A. 2010. Isolation of common carp ovarian follicular cells an evalution of their endocrine activity in primary cell culture. Iranian Journal of Fisheries Science, 9(2): 305–314.
Sunil Kumar G., Bright Singh I.S. and Philip R. 2001. Development of a cell culture system from the ovarian tissue of African catfish (Clarias gariepinus). Aquaculture, 194(1–2): 51–62.
Wen C.M., Lee C.W., Wang C.S., Cheng Y.H. and Huang H.Y. 2008. Development of two cells from Epinephelus coioides brain tissue for characterization of betanodavirus and megalocytivirus infectivity and propagation. Aquaculture, 278: 14–21.
Wolf K. and Quimby M.C. 1976. Primary monolayer culture of fish cells initiated from minced tissue. Tissue Culture Associated Manual, 2(4): 445–448.
Yilmaz F. 2009. The comparison of heavy metal concentrations (Cd, Cu, Mn, Pb, and Zn) in tissues of three economically important fish (Anguilla anguilla, Mugil cephalus and Oreochromis niloticus) inhabiting, Koycegiz Lake- Mugla (Turkey). Turkish Journal of Science and Technology, 4(1): 7–15.
Zhou B., Liu W., Wu R.S.S. and Lam P.K.S. 2005. Culture gill epithelial cells from tilapia (Oreochromis niloticus): A new in vitro assay for toxicants. Aquatic Toxicology, 71: 61–72.