@article { author = {Najafi, Parvane and Aghamaali, Mahmoud Reza Aghamaali and Asghari, Seyed Mohsen}, title = {A metalloprotease molecular cloning and sequencing of Anoxybacillus flavithermus from Qinarjeh, Meshgin-Shahr, Iran}, journal = {Aquatic Physiology and Biotechnology}, volume = {3}, number = {3}, pages = {83-98}, year = {2015}, publisher = {University of Guilan}, issn = {2345-3966}, eissn = {2538-5429}, doi = {}, abstract = {Biomacromolecules of thermophilic organisms are often thermostable. Apart from high temperature they are also known to withstand denaturants of extremely acidic and alkaline conditions. Thermostable enzymes have capable potentioal in the food and paper industries, detergents, drugs, toxic wastes removal and oil drilling. The enzymes can be produced from the thermophiles through either optimized fermentation of the microorganisms or cloning of fast-growing mesophiles by recombinant DNA technology. Metalloproteases are metal ion dependent protease. Metalloproteases that used in this study was a zinc-dependent endopeptidase. Metalloprotease gene was cloned from Anoxybacillus flavithermus. For the amplification of the gene, PCR was performed. A pair of primers designed with a cleavage site for enzymes XhoI and NheI and vector pET21a(+) clone was transformed into BL21 host. The results of the cloned gene sequence analysis showed similarity to the protease gene different variants of the species Anoxybacillus flavithermus.}, keywords = {Metalloprotease,Cloning,Anoxybacillus flavithermus,PCR}, title_fa = {کلونینگ و تعیین توالی ژن متالوپروتئاز مقاوم به گرما از باکتری Anoxybacillus flavithermus به دست آمده از چشمه آب گرم قینرجه، مشگین‌شهر}, abstract_fa = {در موجودات گرمادوست، غالبا بیوماکرومولکول‌ها مقاوم به حرارت هستند. این بیوماکرومولکول‌ها علاوه بر دمای بالا، در شرایط به شدت قلیایی یا اسیدی نیز در برابر دناتوره شدن مقاومت می‌کنند. پروتئازهای پایدار حرارتی پتانسیل قابل توجهی برای بسیاری از صنایع غذایی، تولید کاغذ و شوینده‌ها، حذف ضایعات سمی و حفاری نفت دارند. این آنزیم‌ها را می‌توان از طریق بهینه‌سازی تخمیر گرمادوست در میکروارگانیسم‌ها و یا کلون کردن به روش تکنولوژی DNA نوترکیب در یک میزبان مزوفیل به حداکثر تولید رساند. متالوپروتئازها نیز نوعی پروتئاز وابسته به یون هستند. متالوپروتئازی که در مطالعه حاضر مورد بررسی قرار گرفت یک اندوپپتیداز وابسته به یون روی است. ژن متالوپروتئاز از باکتری Anoxybacillus flavithermus کلون شد. از روش PCR برای تکثیر ژن استفاده شد. یک جفت پرایمر با جایگاه برش برای آنزیم‌های NheI و XhoI طراحی شد، در وکتور pET21a(+) کلون شد و به میزبان BL21 ترانسفورم شد. نتایج حاصل از آنالیز توالی ژن کلون شده حاکی از تشابه ژن مورد نظر با پروتئاز واریانت‌های مختلف گونه Anoxybacillus flavithermus دارد.}, keywords_fa = {متالوپروتئاز,کلونینگ,Anoxybacillus flavithermus,PCR}, url = {https://japb.guilan.ac.ir/article_1793.html}, eprint = {https://japb.guilan.ac.ir/article_1793_1381bfa723abe78611c0ae0d8c13dfa3.pdf} }