دانشگاه گیلان فیزیولوژی و بیوتکنولوژی آبزیان 2345-3966 2 3 2015 10 23 Establishment and characterization of epithelial-like cell line from Caspian trout (Salmo trutta caspius) fin tissues تولید و ارزیابی رده سلولی اپیتلیالی شکل از بافت باله ماهی آزاد دریای خزر (Salmo trutta caspius) 69 88 1338 FA کاوه نوروزی محمدرضا کلباسی پروانه فرزانه سیدابوالحسن شاهزاده فاضلی مریم فرقدان احمد نسیمیان مهرناز ایزدپناه سپیده آشوری موثق شیوا محمدی زهرا مرادمند منصوره فرهنگ‌نیا Journal Article 2015 10 27 Cell lines provide an important biological tool for carrying out investigations into physiology studies and their applications are more growing every day. Here we tried to establish a cell line from Caspian salmon (<em>Salmo trutta caspius</em>). We used Caspian salmon fry and two primary culture methods, Explant and Enzymatic disaggregation were undertaken. Cell migration from pectoral, dorsal, caudal and anal fins was studied. Leibovitz’s L-15 with 20% FBS and 1% Pen-Strep was used as culture medium. Karyotyping was conducted to characterization of established cell line. Consequently cells were freezed with DMSO and stored at -196˚C. Explant Efficiency was showed that the best fin for explant is pectoral fin with the average of 71.31%. In comparison between two primary culture methods, enzymatic disaggregation with trypsin was more efficient. Chromosome counts were suggested 2n=80 and viability was 84.4% after one month storage in liquid nitrogen. Consequently,  these cells have been subcultured, Freezed and defreezed  over 22 times since their initiation and showed reasonable growth rate, therefor they can be used as cell lines in other studies. These cell lines can be reached at Iranian Biological Resource Center (IBRC) as the first aquactic animal cell strain with short names; CS2-1,CS2-2, CSe and IBRC C10190-3 catalogue numbers. امروزه کشت سلول ابزار بسیار مفیدی برای پاسخ به بسیاری از سؤالات در زمینه­ی زیست‌شناسی محسوب می­شود و کاربرد رده­های سلولی روز به روز در حال افزایش است. در این مطالعه تولید کشت اولیه و Cell line ماهی آزاد دریای خزر (<em>Salmo trutta caspius</em>) مورد بررسی قرار گرفت و دو روش کشت اولیه Explant و روش جداسازی آنزیمی به کمک آنزیم تریپسین به منظور تولید کشت اولیه استفاده شد. مهاجرت سلول از باله‌های سینه­ای، پشتی، دمی و مخرجی در روش Explant با یکدیگر مقایسه شد. تاثیر مدت زمان­های مختلف تماس با تریپسین بر روی سلول­ها با یکدیگر مقایسه شد. محیط کشت Leibovitz’s L-15 به همراه %20 FBS و %1 Pen-Strep استفاده شد. به منظور ارزیابی رده تولید شده، از سلول­ها کاریوتیپ تهیه شد و در نهایت این سلول­ها با کمک DMSO فریز شدند و به دمای C˚196- منتقل شدند. محاسبات کارایی کشت بافت نشان داد که باله سینه­ای با میانگین %31/71 بهترین باله به منظور تولید رده سلولی از این ماهی است. در مقایسه کلی بین روش­های کشت اولیه، در روش جداسازی آنزیمی با آنزیم تریپسین نسبت به روش Explant، سلول­های زنده بیش‌تری حاصل شد. عدد کروموزومی سلول­ها 80=n2 بود و درصد زنده­مانی بعد از گذشت یک ماه در ازت مایع  %4/84 بود‌. با توجه به اینکه این سلول­ها تا 22 نوبت پاساژ و انجماد و ذوب متوالی، از قابلیت رشد خوبی برخوردار بوده­اند، از آن‌ها می‌توان در مطالعات مختلف استفاده کرد. این سلول­ها به عنوان  اولین رده سلولی Cell Strain) ) از آبزیان تولید شده در کشور در بانک سلول‌های جانوری مرکز ذخائر ژنتیکی و زیستی ایران (IBRC) با کدهای CS2-1، CS2-2 و CSe و شماره دستیابی 3-IBRC C10190 نگهداری می‌شود. https://japb.guilan.ac.ir/article_1338_98790f540e68fa08551a4c9e358f33f6.pdf