دانشگاه گیلان فیزیولوژی و بیوتکنولوژی آبزیان 2345-3966 4 1 2016 06 20 Anticancer effects of Laurencia caspica extract on breast cancer T47D cell line اثرات ضدسرطانی عصاره جلبک قرمز Laurencia caspica بر رده سلولی T47D سرطان پستان 69 83 1894 FA مژده شفقی دانشجوی کارشناسی ارشد بیوتکنولوژی دریا، گروه زیست‌شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد لاهیجان علی صالح زاده استادیار گروه زیست‌شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد رشت اعظم مشفق استادیار گروه زیست‌شناسی، دانشگاه آزاد اسلامی واحد لاهیجان Journal Article 2016 03 19 In order to treat cancer many drugs and natural products from different plants and animals are used. Laurencia caspica is one of the macroalgae of the Caspian Sea ecosystem. In the present study the toxicity effect and changes in nm23 metastatic gene expression treated with L. caspica extract was evaluated. L. caspica alga was collected from the Ramsar beach and its hydroalcholic extracts were prepared via percolation method in 50% methanol. The breast cancer T47D cell line was treated with concentrations of 25, 50, 100, 200, 400 and 800µg/ml of extract. MTT assay was used to analyze extracts lethality. RNA was extracted and cDNA was synthesized. The specific primers were designed for nm23 and B-actin genes. Level of nm23 gene expression was compared to B-actin reference gene in the presence of the estimated IC50 concentration using Quantitative Real Time PCR. Evaluation of cell survival using MTT assay indicated that L. caspica extract reduced the T47D cell growth in a dose dependent manner and also the 175μg/mL concentration of extract had inhibitory effect on 50% of cells. Real Time PCR showed that the level of nm23 metastatic gene expression had a significant increase, while the B-actin gene expression had not changed. برای درمان سرطان استفاده از ترکیباتی گیاهی و جانوری مختلفی در دست بررسی است. در پژوهش حاضر نیز اثر ضدسرطانی جلبک قرمز Laurencia caspica که یکی از ماکروجلبک‌های اکوسیستم دریای خزر است، مورد مطالعه قرار گرفته است. از این رو اثر سمیت و تغییر بیان ژن سرکوبگر nm23 به وسیله تیمار با عصاره جلبک L. caspica ارزیابی شد. به این ترتیب که جلبک L. caspica از سواحل رامسر جمع‌آوری شد و عصاره هیدروالکلی آن به کمک روش پرکولاسیون با حلال متانول %50 تهیه شد. رده سلولی T47D سرطان پستان در حضور غلظت‌های 25، 50، 100، 200، 400 و 800 میکروگرم در میلی‌لیتر عصاره کشت داده شد و با تست MTT توان کشندگی عصاره بررسی شد. استخراج RNA انجام و cDNA سنتز شد. آغازگرهای اختصاصی برای ژن‌های nm23 و B-actin طراحی و میزان بیان ژن سرکوبگر nm23 نسبت به ژن مرجع B-actin در غلظت IC50 با استفاده از روش Real Time PCR کمی، مورد بررسی قرار گرفت. استفاده از روش MTT نشان داد که عصاره جلبک، رشد سلول‌های T47D را به صورت وابسته به دوز کاهش داد و همچنین در غلظت 175 میکروگرم بر میلی‌لیتر رشد 50 درصد از سلول‌ها مهار شد. نتایج Real Time PCR نشان داد که بیان ژن سرکوبگر nm23 از نظر آماری به طور معنی‌داری افزایش یافت در صورتی که بیان ژن B-actin تغییری حاصل نکرد.

https://japb.guilan.ac.ir/article_1894_e2615e26a9d253fba4806e1f5e0b7aa3.pdf