دانشگاه گیلان فیزیولوژی و بیوتکنولوژی آبزیان 2345-3966 4 2 2016 09 21 Immobilization of Penaeus vanamei protease on carbon nanotubes and investigation of its activity and stability تثبیت آنزیم پروتئاز Penaeus vanamei بر روی نانولوله‌های کربنی و بررسی فعالیت و پایداری آن 35 56 2044 FA پیمان دهقان دانشجوی کارشناسی ارشد زیست‌شناسی دریا، دانشکده علوم و فنون دریایی، دانشگاه هرمزگان احمد همایی استادیار گروه بیوشیمی، دانشکده علوم، دانشگاه هرمزگان Journal Article 2016 08 16 Aquatic industrial waste is rich in protein and the best way to reach this organic material is using a protease enzyme. Therefore, the selection of a resistant protease from an aquatic species and using a suitable substrate for immobilization is very importatnt. In this study, the purified protease from shrimp <em>Penaeus vanamei</em> was immobilized on multi-walled carbon nanotubes (MWCNTs). After activating MWCNTs with nitric acid, in ordet to binding of enzyme to MWCNTs, enzyme solution with concentration of 7mg/mL was added to MWCNTs and incubated at 10°C for 4 hours. After three washing with phosphate buffer (pH 7.5), the nano-enzyme was dissolved in 1mL of phosphate buffer. Based on the results, the enzyme immobilizations on the MWCNTs enhance significantly the stability to temperature and extreme pH values. The optimum temperature of immobilized enzyme increased from 60 to 80°C and optimum pH did not change. The kinetic indexes of the enzyme (K_m and k_cat) changed during the immobilization. These results indicate that immobilized <em>Penaeus vanamei</em> protease on MWCNTs could be used for biotechnological applications due to the high stability. پسماند صنعت آبزیان غنی از پروتئین بوده و بهترین راه بدست آوردن این مواد آلی استفاده از آنزیم‌های پروتئاز است. از این رو، انتخاب یک پروتئاز مقاوم از یک گونه آبزی و استفاده از یک بستر مناسب برای تثبیت و استفاده طولانی مدت آن بسیار با اهمیت است. در این پژوهش پروتئاز خالص شده از میگوی <em>Penaeus vanamei</em> روی نانولوله‌های کربنی چندجداره (MWCNT_S) تثبیت شد. پس از فعال کردن نانولوله‌ها با اسید نیتریک، به منظور اتصال الکترواستاتیک آنزیم به آن، محلول پروتئینی با غلظت mg/mL7 به نانولوله‌ها اضافه شد و محلول به دست آمده به مدت 4 ساعت در دمای C°10 انکوبه شد. بعد از 3 بار شستشو با بافر فسفات (pH 5/7)، نانوآنزیم در mL1 بافر فسفات حل شد. بر اساس نتایج به دست آمده، تثبیت آنزیم روی بستر نانولوله‌های کربنی، پایداری طولانی مدت، پایداری حرارتی و پایداری درpH های بحرانی را به میزان قابل توجهی بهبود بخشید. دمای بهینه آنزیم تثبیت شده از60 به C°80 افزایش یافت و pH بهینه تغییری نکرد. شاخص‌های سینتیکی آنزیم (K_m و k_cat) نیز در هنگام تثبیت دستخوش تغییر شدند. این نتایج نشان می‌دهد که از آنزیم پروتئاز <em>Penaeus vanamei</em> تثبیت شده بر روی نانولوله‌های کربنی چندجداره، به دلیل پایداری بالا، می‌توان برای کاربردهای بیوتکنولوژی استفاده کرد. https://japb.guilan.ac.ir/article_2044_33f023bcdb45bdae360bf4651d941a98.pdf