دانشگاه گیلان فیزیولوژی و بیوتکنولوژی آبزیان 2345-3966 4 3 2016 12 20 Investigation of expression of CYP19(a) and reproduction in Danio rerio fed a diet enriched with Vitex agnus castus extract بررسی بیان ژن CYP19(a) و عملکرد تولیدمثلی ماهی گورخری (Danio rerio) تغذیه شده با جیره غنی شده با عصاره گیاه پنج انگشت (Vitex agnus castus) 27 42 2159 FA طیبه عنایت غلامپور دانشجوی دکتری شیلات، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان ولی اله جعفری دانشیار گروه شیلات، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان محمدرضا ایمانپور استاد گروه شیلات، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان حامد کلنگی استادیار گروه شیلات، دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان Journal Article 2016 08 02 P450 aromatase (CYP19(a)) is the key steroidogenic enzyme responsible for conversion of androgens to estrogens which play a critical role in developmental and sex differentiation. Hence, this study was done to evaluate the effect of <em>Vitex agnus castus</em> hydroalchoholic extract on reproductive performance, sex ratio and expression of CYP19(a), one of the most important gene related to gender, using RT-PCR method in zebrafish. The larvae were fed post-hatching with diets containing extracts of four levels included 0 (control group T₀), 5 (T₁), 10 (T₂) and 15 (T₃) g/Kg food for 45 days. For gene expression studies, samples of larvae at 4, 7, 10, 15, 30 and 45 days post-hatching were collected. Expression of <em>β-actin</em> housekeeping genes was normalized as reference gene. Gene expression was evaluated by using 2^-ΔΔCT method. The reproductive performance was significantly better in T₂ and T₃ than other treatments (P<0.05). With increasing concentration of extract in the diet, the ratio of female to male increased (P<0.05). T₃ Treatment leading to 87.23% female. The use of plant extract increased the expression of gene CYP19(a), so at the time of differentiation of gonad (45 days after hatching), the highest expression of this gene was occurred. Overall, suggest the use of T₃ treatment to achieve the best reproductive performance and a higher percentage of females in zebrafish as model for aquaculture species. آروماتاز P450 (CYP19(a)) یک آنزیم استروئیدوژنیک کلیدی در تبدیل آندروژن به استروژن است که نقش مهمی را در تمایز جنسی و تکامل گناد ایفا می‌کند. از این رو، در مطالعه حاضر به بررسی تاثیر عصاره هیدروالکلی گیاه پنج انگشت بر عملکرد تولیدمثلی، نسبت جنسی و بیان یکی از مهمترین ژن‌های­ مرتبط با جنسیت (CYP19(a))، با استفاده از روش RT-PCR در ماهی گورخری پرداخته شد. لاروها پس از تفریخ با جیره غذایی آزمایشی در چهار سطح 0 (گروه شاهد 0T)، 5 (₁T)، 10 (₂T) و 15 (₃T) گرم عصاره در هر کیلوگرم غذا به مدت 45 روز تغذیه شدند. به منظور انجام بیان ژن، نمونه‌برداری از ماهیان در روزهای 4، 7، 10، 15، 30 و 45 پس از تفریخ، صورت گرفت. نرمال‌سازی بیان ژن هدف با استفاده از ژن مرجع <em>β-actin </em>و آنالیز نتایج بیان ژن با استفاده از روش ^∆∆CT-2­ صورت گرفت. ﻋﻤﻠﻜﺮد تولیدمثلی در تیمارهای ₂T و ₃T به طور معنی­داری بهتر از سایر تیمارها بود؛ به طوری که هماوری مطلق، شاخص گنادی و طول و وزن لاروها در این تیمارها بالاتر بود (05/0>P). با افزایش غلظت عصاره در جیره، ﻧﺴﺒﺖ جنس ماده به نر افزایش یافت (05/0>P). به طوری که در تیمار ₃T، منجر به تولید 23/87 درصد جنس ماده شد. تحت تاثیر عصاره بیان ژن CYP19(a) نیز افزایش یافت، به طوری که در زمان تمایز گنادها (45 روز پس از تفریخ) بالاترین بیان این ژن‌ها صورت گرفت. در مجموع، می­توان استفاده از تیمار ₃T را برای دستیابی به بهترین عملکرد تولیدمثلی و درصد بالاتری از جنس ماده در ماهی گورخری به عنوان گونه مدل در آبزی‌پروری، پیشنهاد کرد. https://japb.guilan.ac.ir/article_2159_beb4f095f55ba5eeea1f1a657d41148a.pdf