بررسی میزان حساسیت کشت سلولی اولیه از باله دمی ماهی سفید دریای خزر (Rutilus kutum ) به ویروس ویرمی بهاره کپور (SVCV)

نوع مقاله : مقاله پژوهشی

نویسندگان

1 دانشجوی کارشناسی ارشد شیلات، گروه شیلات، واحد بندرانزلی، دانشگاه آزاد اسلامی، بندر انزلی، ایران

2 استادیارگروه شیلات، واحد بندرانزلی، دانشگاه آزاد اسلامی، بندر انزلی، ایران

3 استادیار پژوهشکده آبزی پروری آبهای داخلی کشور، موسسه تحقیقات علوم شیلاتی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، بندرانزلی، ایران

10.22124/japb.2022.21587.1456

چکیده

در این مطالعه برای اولین بار میزان حساسیت کشت سلولی اولیه از باله دمی ماهی سفید دریا ی خزر به عنوان گونه بومی شاخص و نیز مهم‌ترین ماهی تجاری در جنوب این حوضه، به ویروس ویرمی بهاره کپور (SVCV)، عامل عفونی حاد، خونریزی دهنده و مسری به صورت درون آزمایشگاهی (In vitro) مورد سنجش قرار گرفت. بدین منظور، کشت سلولی اولیه از باله دمی بچه ماهیان سفید با استفاده از روش کشت بافت و تیمار با آنزیم تریپسین انجام شد. پس از تکثیر آزمایشگاهی سویه استاندارد ویروس ویرمی بهاره کپور، ویروس در رقت‌های مختلف، در شش تکرار به پلیت‌های 96 خانه حاوی تک لایه سلولی باله ماهی سفید پس از پنج بار کشت مجدد و نیز تیره سلولی EPC تلقیح و سپس آزمایش آنتی‌بادی فلورسانس به روش غیرمستقیم برای تشخیص ماهیت ویروس به کار گرفته شد. ایجاد آثار آسیب سلولی در کشت سلولی اولیه باله دمی همزمان با مشاهده این آثار تخریب سلول در رده EPC و نیز حضور آنتی‌ژن SVCV روی کشت سلولی باله دمی ماهی سفید دریای خزر به صورت نقاط درخشان، به وضوح تاییدی بر حساسیت کشت سلولی اولیه باله دمی ماهی سفید به ویروس ویرمی بهاره کپور است.

کلیدواژه‌ها

موضوعات


عبدلی ا. و  نادری م. 1387. تنوع زیستی ماهیان حوضه جنوبی دریای خزر. انتشارات علمی آبزیان. 244ص.
نیک‌قربان س.، حقیقی کارسیدانی س. و قاسمی م. 1398. بررسی شرایط بهینه تهیه کشت سلولی اولیه از کلیه ماهی سفید  (Rutilus kutum) به روش کاشتن. زیست‌شناسی دریا، 11: 90-79.
Abadi Z.T.R., Abtahi B., Grossart H.P. and Khodabandeh S. 2021. Microplastic content of kutum fish, Rutilus frisii kutum in the southern Caspian Sea. Science of The Total Environment, 752: 1–15 (141542).
Agol V.I. 2012. Cytopathic effects: Virus-modulated manifestations of innate immunity? Trends in Microbiology, 20: 570–576.
Ahne W., Bjorklund H., Essbauer S., Fijan N., Kurath G. and Winton J. 2002. Spring viremia of carp (SVC). Diseases of Aquatic Organisms, 52: 261–272.
Ashraf U., Lu Y., Lin L., Yuan J., Wang M. and Liu X. 2016. Spring viraemia of carp virus: Recent advances. Journal of General Virology, 97: 1037–1051.
Avella M., Berhaut J. and Payan P. 1994. Primary culture of gill epithelial cells from the sea bass Dicentrarchus labrax. In Vitro Cellular and Developmental Biology-Animal, 30: 41–49.
Emadi H. 1979. The State of the Fishing and Reproduction of the Kutum, Rutilus frisii kutum, in the Caspian Sea of Iran. Journal of Ichthyology, 19(4): 151–154.
Fazli H. and Parafkandeh Haghighy F. 2016. Spatiotemporal abundance and diversity of bonyfishes in beach seines in Iranian waters of the Caspian Sea. Fisheries Science and Technology, 5: 109–120.
Fazli H., Daryanabard G., Pourgholam R., Abdolmalaki S., Bandani A., Pourgholami A. and Safavi S. 2012. Qualitative assessment of Caspian kutum (Rutilus frisii kutum Kamensky 1901) stocks in Iranian waters of the Caspian Sea (1991-2011). Iranian Scientific Fisheries Journal, 21: 53–64.
Freshney R.I. and Freshney M.G. 2004. Culture of Epithelial Cells. John Wiley and Sons, USA. 441P.
Gardell A.M., Qin Q., Rice R.H., Li J. and Kultz D. 2014. Derivation and osmotolerance characterization of three immortalized tilapia (Oreochromis mossambicus) cell lines. PLoS One, 9: 1–14 (e95919).
Ghasemi M., Zamani H., Hosseini S., Karsidani S.H. and Bergmann S. 2014. Caspian white fish (Rutilus frisii kutum) as a host for spring viraemia of carp virus. Veterinary Microbiology, 170: 408–413.
Hadifar M., Haghighi Karsidani S. and Ghasemi M. 2019. The Primary cell culture from caudal fin tissue of Caspian Kutum (Rutilus frisii kutum). Iranian Scientific Fisheries Journal, 28: 95–104.
Iranian Fisheries Organization, 2019. Annually Statistical Report, Iranian Fisheries Organization, Iran. 64P.
Kennedy M. 2005. Methodology in diagnostic virology. Veterinary Clinics: Exotic Animal Practice, 8: 7–26.
Lakra W., Swaminathan T.R. and Joy K. 2011. Development, characterization, conservation and storage of fish cell lines: A review. Fish Physiology and Biochemistry, 37: 1–20.
Lei C., Yang J., Hu J. and Sun X. 2021. On the calculation of TCID 50 for quantitation of virus infectivity. Virologica Sinica, 36: 141–144.
Lei X.Y., Chen Z.Y., He L.B., Pei C., Yuan X.P. and Zhang Q.Y. 2012. Characterization and virus susceptibility of a skin cell line from red-spotted grouper (Epinephelus akaara). Fish Physiology and Biochemistry, 38: 1175–1182.
Leibovitz A. 1963. The growth and maintenance of tissue-cell cultures in free gas exchange with the atmosphere. American Journal of Hygiene, 78: 173–180.
Pereira H. 1962. The cytopathic effect of animal viruses. Advances in virus research, 8: 245–285.
Petty B.D., Riggs A.C., Klinger R., Yanong R. and Francis-Floyd R. 2002. Spring Viremia of Carp. Fact Sheet VM-142, University of Florida Cooperative Extension Institute of Food and Agricultural Sciences. 4P.
Sobhana K., George K., Venkat Ravi G., Ittoop G. and Paulraj R. 2009. Development of a cell culture system from gill explants of the grouper, Epinephelus malabaricus (Bloch and Shneider). Asian Fisheries Science, 22: 541–547.
Stone  D.M.,  Ahne  W.,  Denham K.L., Dixon P.F., Liu C.T.Y., Sheppard A.M., Taylor G.R. and Way K. 2003. Nucleotide sequence analysis of the glycoprotein gene of putative spring viraemia of carp virus and pike fry rhabdovirus isolates reveals four genogroups. Diseases of Aquatic Organisms, 53(3): 203–210.
Volpato G.L., Goncalves-De-Freitas E. and Fernandes-De-Castilho M. 2007. Insights into the concept of fish welfare. Diseases of Aquatic Organisms, 75: 165–171.
Wang Y., Zhang H., Lu Y., Wang F., Liu L., Liu J. and Liu X. 2017. Comparative transcriptome analysis of zebrafish (Danio rerio) brain and spleen infected with spring viremia of carp virus (SVCV). Fish and Shellfish Immunology, 69: 35–45.
Wolf K. and Ahne W. 1982. Fish cell Culture. Advances in Cell Culture, 2: 305–328.
Yan W., Nie P. and Lu Y. 2011. Establishment, characterization and viral susceptibility of a new cell line derived from goldfish, Carassius auratus (L.), tail fin. Journal of Fish Diseases, 34: 757–768.
Zamani H., Ghasemi M., Hosseini S. and Karsidani S.H. 2014. Experimental susceptibility of Caspian white fish, Rutilus frisii kutum to Spring viraemia of carp virus. Virus Disease, 25: 57–62.
Zeng W., Dong H., Chen X., Bergmann S.M., Yang Y., Wei X., Tong G., Li H., Yu H. and Chen Y. 2022. Establishment and characterization of a permanent heart cell line from largemouth bass Micropterus salmoides and its application to fish virology and immunology. Aquaculture, 547: 1–12 (737427).